Набор для определения билирубин конъюгированный инструкция

Набор для определения билирубин конъюгированный инструкция

БИЛИРУБИН-ВИТАЛ-03

ЦЕНА

НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ОБЩЕГО И ПРЯМОГО БИЛИРУБИНА

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ МЕТОДОМ МАЛЛОЙ-ЭВЕЛИНА

Кат. № В 03.03 – (250 мл +250 мл)

ПРИНЦИП МЕТОДА

Общий билирубин определяется на основе реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой, после диссоциации неконъюгированного (непрямого, свободного) билирубина под действием детергента. Для определения содержания конъюгированного (прямого, связанного) билирубина из реакционной смеси исключается детергент. Концентрация неконъюгированного билирубина рассчитывается по разнице концентрации между общим и конъюгированным билирубином.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ)

Свежая сыворотка крови без следов гемолиза

СОСТАВ НАБОРА

РЕАГЕНТ № 1 – РЕАГЕНТ НА ОБЩИЙ БИЛИРУБИН

Кислота сульфаниловая…………………………….32 ммоль/л

HCl…………..……………………………………50 ммоль/л

Детергент

РЕАГЕНТ № 2 – РЕАГЕНТ НА ПРЯМОЙ БИЛИРУБИН

Сульфаниловая кислота………………………32 ммоль/л

HCl……………………………………………150 ммоль/л

РЕАГЕНТ № 3 – НАТРИЯ НИТРИТ

Натрия нитрит………………….………………31 ммоль/л

РЕАГЕНТ № 4 – КАЛИБРАТОР

Билирубин………………………………….85,5 мкмоль/л

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Линейность — отклонение не более 5 %

в диапазоне концентраций 5-340 мкмоль/л

Чувствительность — не более 5 мкмоль/л

Коэффициент вариации – не более 5 %

Время проведения анализа: 5 мин

ХРАНЕНИЕ

1. Срок годности набора – 12 мес

( хранение при 2-4°С).

ВНИМАНИЕ! Тщательно закрывайте флаконы непосредственно после каждого использования реагентов.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ КАЛИБРАТОРА

Внести 2 мл бидистиллированной воды во флакон № 4.

Концентрация билирубина в растворе – 85,5 мкмоль/л.

Разведенный калибратор стабилен до 5 дней при температуре хранения 2-4°С.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Длина волны: 555 нм (530-580 нм)

Длина оптического пути: 1 см.

Температура инкубации: 18-25°С.

Для определения общего билирубина внести в пробирки:

 

Реагенты

Общий билирубин

Опытная

проба

Калибровочная

проба

Холостая

проба

Реагент № 1

1,8 мл

1,8 мл

1,8 мл

Реагент № 3

0,05 мл

0,05 мл

Реагент № 4

0,1 мл

Образец

0,1 мл

0,1 мл

 

Пробы перемешать и инкубировать 5 мин при 18-25°С.

Для определения прямого билирубина внести в пробирки:

 

Реагенты

Прямой билирубин

Опытная

проба

Холостая

проба

Реагент № 2

1,8 мл

1,8 мл

Реагент № 3

0,05 мл

Реагент № 4

Образец

0,1 мл

0,1 мл

 

Пробы перемешать и инкубировать точно 5 мин при

18-25°С.

Фотометрировать опытные пробы против холостых проб.

Калибровочные пробы фотометрировать против контроля на реактивы (для этого из реакционной смеси исключить реагент № 4)

РАСЧЕТЫ

Расчет концентрации билирубина (С):

С= Аопкал´ 85,5 [мкмоль/л],

где: Аоп— адсорбция опытной пробы,

Акал-адсорбция калибровочной пробы,

85,5 мкмоль/л – концентрация билирубина в калибраторе.

Калибровочную пробу при измерении прямого билирубина ставить не нужно. Для расчета концентрации прямого билирубина использовать значение оптической плотности, полученное при постановке калибровочной пробы в реакции на общий билирубин.

НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ

Общий билирубин: 8,5-20,5 мкмоль/л.

ПРИМЕЧАНИЯ

1. Реагенты смешивать в указанном порядке; реакция начинается при добавлении сыворотки.

2. При концентрации билирубина, превышающей 340 мкмоль/л сыворотку крови следует развести. При расчете концентрации учесть степень разведения.

3. Реагент № 4 светочувствителен!!! И сухой и разведенный калибратор хранить в темноте!

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Правильность проверена при помощи контрольных сывороток “Accutrol normal chemistry control” & “Accutrol abnormal chemistry control (Sigma chemical company, USA).

 



Источник: labdiagnostics.ru

Читайте также
Вид:

Добавить комментарий